菲羅門MARS MCa色譜柱使用指南
1、菲羅門MARS MCa色譜柱運(yùn)行參數(shù):
? pH 范圍:4-8
? 壓力:正常使用壓力約350 psi (24 bar);最高限壓1000 psi (69 bar)。
? 流速:確保不超過最大壓力限制,一般流速不超過0.6mL/min。
? 柱溫:一般使用溫度為60 ~ 85°C;最高溫度上限為85°C。
2、菲羅門MARS MCa色譜柱開始使用步驟:
? 連接色譜柱前,先用過濾并脫氣處理的HPLC 級(jí)純水沖洗整個(gè)系統(tǒng)和管路。
? 連接色譜柱并啟動(dòng)柱溫箱,先以0.1mL/min 的流速運(yùn)行,確保壓力在400psi 以下。隨溫度逐漸上升,用幾分鐘的時(shí)間將流速逐步上調(diào),直到柱溫達(dá)到操作溫度時(shí),將流速提高至指定流速。
3、菲羅門MARS MCa色譜柱結(jié)束步驟:
? 若過夜保存,緩慢降低流速至0.1mL/min 下運(yùn)行,并保持實(shí)驗(yàn)柱溫。
? 若長(zhǎng)期不用,清洗保存后,關(guān)閉柱溫箱并緩慢降低流速,最后關(guān)閉泵,待系統(tǒng)冷卻至室溫后,卸下色譜柱并用柱堵頭塞緊色譜柱。
4、菲羅門MARS MCa色譜柱避免事項(xiàng):
? · 突然升壓;壓力>1000 psi (69 bar)。本系列對(duì)壓力非常敏感,請(qǐng)?jiān)O(shè)置儀器限壓以保護(hù)色譜柱。
? · 所有的非鈣鹽和金屬離子。
? · 絕對(duì)避免有機(jī)相如甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈等。
? · 無機(jī)改性劑CaSO4、Ca(NO3)2、CaCl2 超過5%。
? · 酸、堿。
? · 機(jī)械沖擊。請(qǐng)輕拿輕放,避免對(duì)色譜柱造成物理撞擊。
5、流動(dòng)相:經(jīng)典流動(dòng)相為HPLC 級(jí)純水;使用前需對(duì)所有流動(dòng)相進(jìn)行過濾和脫氣;需經(jīng)常更換流動(dòng)相以避免微生物污染;溶劑不互溶及鹽的析出可造成色譜柱永久性的損傷。
6、樣品制備:請(qǐng)檢驗(yàn)樣品在流動(dòng)相中的溶解性,盡可能采用流動(dòng)相作為樣品稀釋溶劑;進(jìn)樣前需用0.45或0.22μm 的濾膜過濾樣品。
7、清洗與保存:HPLC 級(jí)純水。保存放置的色譜柱,應(yīng)定期拿出來用色譜純水沖洗,避免微生物污染。