色譜柱性能下降的原因及維護(hù)方法具體如下:
### 一、色譜柱性能下降的原因
1. **熱損壞**:
* 超出色譜柱的溫度上限會(huì)導(dǎo)致固定相和管表面的加速損壞,從而造成色譜柱的過度流失、活性組分形成拖尾,以及降低柱效(分離度)。
2. **氧損壞**:
* 氧是許多毛細(xì)管GC柱的大敵。在室溫或近于室溫的溫度下,不會(huì)損壞色譜柱,但隨柱溫的升高色譜柱將被嚴(yán)重?fù)p壞。
3. **化學(xué)損壞**:
* 長時(shí)間暴露在化學(xué)試劑中可能導(dǎo)致色譜柱的損壞,特別是流動(dòng)相中的某些化學(xué)物質(zhì)可能對柱填料產(chǎn)生損傷。
4. **樣品污染**:
* 樣品中可能存在的顆粒物或化學(xué)物質(zhì)會(huì)污染色譜柱,導(dǎo)致性能下降。
5. **柱架問題**:
* 柱架不穩(wěn)定或受到振動(dòng)可能導(dǎo)致色譜柱性能下降。
6. **流動(dòng)相問題**:
* 流動(dòng)相的質(zhì)量不合格或組成發(fā)生變化可能導(dǎo)致色譜柱性能下降。
7. **貯存與維護(hù)不當(dāng)**:
* 長期改變色譜柱的使用頻率或放置在不適宜的環(huán)境中可能導(dǎo)致填充物泄漏。
### 二、色譜柱的維護(hù)方法
1. **避免壓力和溫度的急劇變化**:
* 溫度的突然變化或使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況。 * 柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此,在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩。
2. **逐漸改變?nèi)軇┑慕M成**:
* 特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?
3. **避免反沖**:
* 一般說來色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效。
4. **選擇適宜的流動(dòng)相**:
* 選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。 * 有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
5. **定期沖洗色譜柱**:
* 經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。 * 在進(jìn)行清洗時(shí),對流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右。
6. **正確的保存方法**:
* 保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。 * 禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時(shí)間。
7. **處理色譜柱使用過程中可能出現(xiàn)的問題**:
* 色譜柱使用過程中,如果壓力升高,可能是燒結(jié)濾片被堵塞,這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗。 * 如果柱效降低或色譜峰變形,可能是柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大。此時(shí)應(yīng)小心擰開柱接頭,用潔凈小鋼將柱頭填料取出1\~2mm高度(注意把被污染填料取凈),再把柱內(nèi)填料整平。 * 在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱(5\~30mm),可以起到保護(hù)、延長柱壽命的作用。
8. **補(bǔ)加填料**:
* 新的色譜柱在使用一段時(shí)間后柱頂填料可能塌陷,使柱效下降,這時(shí)可補(bǔ)加填料使柱效恢復(fù)。
9. **使用后的處理**:
* 每次工作完后,用洗脫能力強(qiáng)的洗脫液沖洗。例如,ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。 * 當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí),使用完后應(yīng)用無鹽流動(dòng)相沖洗。
10. **其他注意事項(xiàng)**:
* 含鹵族元素(氟、氯、溴)的化合物可能會(huì)腐蝕不銹鋼管道,不宜長期與之接觸。 * 裝在HPLC儀上柱子如不經(jīng)常使用,應(yīng)每隔4\~5天開機(jī)沖洗15分鐘。
綜上所述,色譜柱性能下降的原因多種多樣,而正確的維護(hù)方法可以有效延長色譜柱的使用壽命并提高分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。 |